⑴检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用（液体）进行一系列的梯度稀释。将稀释后的水样分别用涂布到培养基表面上，然后将培养皿于恒温培养箱，在℃条件进行培养。

⑵下图表示利用分离法分离和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是。

A.步骤①倒平板操作时，只需要在超净台中不需要在酒精灯火焰旁进行

B.步骤②③使用的工具是接种环，接种前需在明火上烧红后冷却

C.步骤④恒温培养箱培养后的结果说明整个过程中蘸取菌液4次

D.该方法使单菌落更容易分开，但操作复杂些

⑴原生质体的分离：在无菌条件下，取烟草无菌苗的叶片，放入含有0.5〜0. 6mol/L的（维持较高渗透压）的果胶酶和纤维素酶混合液处理，经过离心纯化后获得形原生质体。

⑵原生质体的培养：将原生质体进行培养，重新长出细胞壁，形成胚性细胞。胚性细胞继续培养形成细胞团，然后经两条途径形成再生植株。途径一：细胞团经胚、心形胚和胚状体，最后发育成植株。途径二：细胞团增殖为愈伤组织，然后在发芽培养基上诱导出苗，切割芽经过生根后形成完整植株。

⑶为了对烟草的某些性状进行改良，可借助工程方法，将外源遗传物质（DNA)导入原生质体受体，再对其进行培养获得具有特定性状的再生植株。上述操作属于工程技术的操作过程。