生物兴趣小组以苹果为材料开展细胞中DNA含量测定研究，主要实验流程如图，其中SDS（十二烷基硫酸钠）具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性等作用，苯酚和氯仿不溶或微溶于水，它们的密度均大水．请分析回答：

题型：综合题题类：模拟题难易度：普通

2016年江苏省南通市高考生物三模试卷

（1）、步骤①中苹果组织研磨前先经液氮冷冻处理的主要优点是．在常温条件下，也可向切碎的组织材料中加入一定量的，再进行充分搅拌和研磨．

（2）、根据实验流程可推知，步骤③、④所依据的原理是．

（3）、步骤⑤加入2～3倍体积的95%乙醇的目的是．

（4）、下面是某同学设计的DNA鉴定实验的主要步骤：

①取1支20mL试管，向其中先后加入2mol•L^﹣1的NaCl溶液5mL和少量絮状DNA沉淀，用玻棒搅拌使其溶解．

②向试管中加入4mL二苯胺试剂，混匀后将试管置于50～60℃水浴中加热5min，待试管冷却后，观察溶液是否变蓝．

请指出上面实验步骤中的两个错误：、．

（5）、兴趣小组成员还以同种苹果的不同组织器官为材料，测定不同组织细胞中DNA的含量，结果如下表（表中数值为每克生物材料干重中DNA含量）：

组织器官	韧皮部	形成层	冬芽	秋梢嫩叶	成熟叶片
含量/μg•g^﹣1	80.00	150.00	160.00	120.00	70.00

试从细胞分裂的角度，解释不同生物材料中DNA含量差异明显的原因．

举一反三

上述操作过程正确的顺序是（）

步骤①收集藻细胞：将两种藻细胞培养液进行预处理后，离心取沉淀物。

步骤②获取叶绿体粗：提物4℃下分别破碎两种藻细胞后，再分别用差速离心法和密度梯度离心法分离获取叶绿体粗提物(原理示意图如下)。

步骤③去除杂质DNA：向步骤②的叶绿体粗提物中加入DNA酶、缓冲液，37℃静置15min后，离心取沉淀物。

步骤④粗提叶绿体DNA：向步骤③获得的叶绿体中加入缓冲液、SDS、蛋白酶K，60℃水浴2h，离心取上清液。再向上清液中加入氯仿异戊醇，在4℃下离心取　？　。

步骤⑤纯化叶绿体DNA：向粗提溶液中加入3mol·L^－1醋酸钠及预冷的95%酒精，低温静置1h后，离心弃上清液。加预冷的95%酒精、离心洗涤1～2次，取沉淀物用超纯水溶解。

步骤⑥DNA纯度和浓度：测定利用分光光度法测量并计算叶绿体DNA的纯度及浓度，结果如上下表(表中OD₂₆₀/OD₂₈₀值越接近1.8说明DNA越纯)。

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