乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：

(1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用{#blank#}1{#/blank#} 作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是{#blank#}2{#/blank#} 。从功能上讲，这种培养基属于{#blank#}3{#/blank#} 。

(2)培养微生物L前，宜采用{#blank#}4{#/blank#} 方法对接种环进行灭菌。

(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越{#blank#}5{#/blank#} .

(4)乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的{#blank#}6{#/blank#} 确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括{#blank#}7{#/blank#} 、{#blank#}8{#/blank#} 、离子吸附法及交联法等。

由于石油价格的不断上涨，替代化石燃料的产品如燃料酒精、生物柴油、沼气等的开发备受世界关注，有人想利用玉米秸秆生产燃料酒精，其大致流程为：

（1）玉米秸秆预处理后，应该选用{#blank#}1{#/blank#} 进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖．

（2）分离这种水解酶的野生菌株一般从土壤中筛选，所需要的培养基为{#blank#}2{#/blank#} 培养基，但现有的野生菌株对玉米秸秆的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株．

实验步骤：

①配制{#blank#}3{#/blank#} （固体、半固体、液体）培养基，该培养基的碳源应为{#blank#}4{#/blank#} ．

②将野生菌株接入已经用{#blank#}5{#/blank#} 法灭菌的培养基平板上．

③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是对野生菌株进行{#blank#}6{#/blank#} ．

④菌落形成后，加入{#blank#}7{#/blank#} 染液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小，周围出现{#blank#}8{#/blank#} （现象）的菌落即为初选菌落．

⑤分离、纯化菌种时为得到单菌落，常用{#blank#}9{#/blank#} 法和{#blank#}10{#/blank#} 法接种．

（3）发酵阶段需要的菌种是{#blank#}11{#/blank#} ，生产酒精必须要控制的条件是{#blank#}12{#/blank#} ．

（4）生产的酒精易挥发但可溶于水，宜选用水蒸气蒸馏的方法从酵母菌代谢产物中提取．