题型：实验探究题 题类：常考题 难易度：普通
实验目的比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性
试管1 | 试管2 | 试管3 | 试管4 | |
蒸馏水 | 2 | 2 | 2 | A |
pH=8缓冲液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
淀粉溶液 | 1 | 1 | 1 | 1 |
甲生物提取液 | 0.3 | |||
乙生物提取液 | 0.3 | |||
丙生物提取液 | 0.3 | |||
总体积 | 3.8 | 3.8 | 3.8 | B |
实验原理略．
实验材料：三种微生物淀粉酶提取液（提取液中酶蛋白浓度相同）等．
实验步骤：
a．取四支试管，分别编号；
b．按右表内要求进行操作；
c．将上述四支试管放入37℃的水浴，保温1小时；
d．在上述四支试管冷却后滴入碘液；
e．观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅；
实验结果（注：“+”显色，“++”显色更深；“﹣”不显色）
试管1 | 试管2 | 试管3 | 试管4 | |
颜色深浅程 | ++ | ﹣ | + | C |
回答下列问题：
萌发的禾谷类种子中淀粉酶的含量显著增高，主要有α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶．α﹣淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6、0℃下可迅速失活，而β﹣淀 粉酶耐酸、不耐热，在70℃条件下15min后失活．根据它们的这种特性，可分别测定某种酶的催化效率．某实验小组进行了“提取小麦种子中α﹣淀粉酶并测 定α﹣淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”等相关实验．
实验材料：萌发3天的小麦种子（芽长约1cm）．
主要试剂及仪器：1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等．
实验步骤：
步骤一：制备酶溶液．
步骤二：略．
步骤三：取 6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号，按下表要求加入试剂，再观察各试管内的颜色变化（注：+表示碘液变蓝色，﹣表示碘液不变色）．
试管编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
5%的可溶性淀粉溶液（mL） | 8 | 8 | 8 | 8 | 8 | 8 |
恒温水浴5min（℃） | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
α﹣淀粉酶保持活性而β﹣淀粉酶失去活性的溶液 （mL） | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
恒温水浴5min（℃） | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
溶液混合，振荡后恒温水浴5min（℃） | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
加入碘液，振荡后观察颜色变化 | +++ | ++ | + | ﹣ | ++ | +++ |
请回答下列问题：
①谷物的萌发：称取等量小麦、谷子、绿豆三种谷物的干种子，都均分为两份，其中一份浸泡2.5h，放入25℃恒温培养箱，至长出芽体为止．
②酶提取液的制备：将三种谷物的干种子和萌发种子分别里于研钵中，加入石英砂和等量蒸馏水研磨、离心，制备酶提取液．
③反应进程的控制：分别取②制备的酶提取液1mL置于不同的试管中，加入1mL1%的淀粉溶液，25℃保温5min后，立即将试管放入沸水浴中保温5min．
④吸光度的测定：在试管中加入_________、摇匀、加热，当溶液由蓝色变为砖红色后，用分光光度计依次测定各试管的吸光度．
⑤酶活性的计算：将测定值与标准麦芽糖溶液吸光度比对，计算出淀粉酶活性，结果如表：
名称 | 小麦 | 谷子 | 绿豆 |
未萌发谷物的淀粉活性/U•g﹣1 | 0.0289 | 0.0094 | 0.0074 |
萌发谷物的淀粉酶活性/U•g﹣1 | 5 | 1.7645 | 0.0395 |
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