- 二一组卷

题型：综合题题类：常考题难易度：困难

广东省深圳市高级中学2018-2019学年高二下学期生物期中考试试卷

下图1为某种质粒结构，LacZ基因编码的酶能使无色的X—gal变为蓝色，Amp为氨苄青霉素抗性基因。图2为目的基因的序列及其相关限制酶的识别序列和切点。回答下列问题

（1）、若要筛选成功导入目的基因的重组质粒，培养基中应加入的物质有和。构建重组质粒时需要的工具酶有。

（2）、用BamHI和BglII两种限制酶切割目的基因和质粒，构建重组质粒后导入大肠杆菌中，在筛选重组质粒的培养基上，若大肠杆菌菌落显蓝色，说明导入了。

（3）、BamHI酶切的DNA末端与BglII酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为（要求写出双链）。如用BamHI酶、BglII酶和EcoRI酶对于该重组质粒进行切割，能切开个切口。

（4）、下图中A、B、C、D表示利用PCR扩增目的基因过程中可能用到的四种引物，回答下列相关问题：

①PCR技术需要用到酶。

②若需要扩增图中目的基因，由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，则利用PCR技术扩增该基因时需要选择（A、B、C、D）的组合作为引物。

举一反三

下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。

①催化具有相同黏性末端的DNA片段之间连接

②催化具有不同黏性末端的DNA片段之间连接

③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成

④催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形成

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