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题型:综合题 题类: 难易度:困难

【高考真题】浙江省2024年1月普通高校招生选考科目考试生物学试题

 锌转运蛋白在某种植物根部细胞特异性表达并定位于细胞质膜,具有吸收和转运环境中Zn2+的功能。为研究该植物2种锌转运蛋白M和N与吸收Zn2+相关的生物学功能,在克隆M、N基因基础上,转化锌吸收缺陷型酵母,并进行细胞学鉴定。回答下列问题:
(1)、锌转运蛋白基因M、N克隆。以该植物为材料提取并纯化mRNA,反转录合成cDNA。根据序列信息设计引物进行PCR扩增,PCR每个循环第一步是进行热变性处理,该处理的效果类似于生物体内的作用效果。PCR产物琼脂糖凝胶电泳时,DNA分子因为含而带负电荷,凝胶点样孔端应靠近电泳槽负极接口;当2个PCR产物分子量接近时,若延长电泳时间,凝胶中这2个条带之间的距离会。回收DNA片段,连接至克隆载体,转化大肠杆菌,测序验证。
(2)、重组表达载体构建。分别将含M、N基因的重组质粒和酵母表达载体同时进行双酶切处理,然后利用连接,将得到的重组表达载体转化大肠杆菌。用PCR快速验证重组转化是否成功。此反应可以用大肠杆菌悬液当模板的原因是
(3)、酵母菌转化。取冻存的锌吸收缺陷型酵母菌株,直接在固体培养基进行培养,活化后接种至液体培养基,采用以扩大菌体数量,用重组表达载体转化酵母菌。检测M、N基因在受体细胞中的表达水平,无显著差异。
(4)、转基因酵母功能鉴定。分别将转化了M、N基因的酵母菌株于液体培养基中培养至OD600为0.6。将菌液用法逐级稀释至OD600为0.06、0.006和0.0006,然后各取10μL菌液用涂布器均匀涂布在固体培养基上,培养2天,菌落生长如图。该实验中阴性对照为。由实验结果可初步推测:转运蛋白M和N中,转运Zn2+能力更强的是,依据是

注:OD600为波长600nm下的吸光值,该值越大,菌液浓度越高;空载体为未插入M或N基因的表达载体。

举一反三

1中含有链霉素,其它培养基中不含链霉素.请据实验回答:

(1)将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养,接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养.“印章”位置保持不变.培养皿2、3根据其功能,分别称为{#blank#}1{#/blank#} 培养基、{#blank#}2{#/blank#} 培养基.

(2)培养基3的A点处有菌落生长,将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中.如图反复几次实验.请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”:{#blank#}3{#/blank#} .

(3)要分离出单个菌落,除了本实验中的涂布法外,还可以用{#blank#}4{#/blank#} 法.

(4)上述不含链霉素培养基通常使用的是{#blank#}5{#/blank#} , 下表是另一种培养基配方,该培养基具有{#blank#}6{#/blank#} 作用.

成分

KH2PO4

Na2PO4

MgSO4•7H2O

葡萄糖

尿素

琼脂

含量

1.4g

2.1g

0.2g

0.0g

1.0g

15.0g

(5)现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5,它们不能合成生长所必需的物质G,已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物,但不知这些物质合成的顺序,于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响,结果如下表所示.根据以上结果,推测这几种物质的合成顺序应是{#blank#}7{#/blank#} .

物质

突变体

培养基中加入的物质

A

B

C

D

E

F

1

+

+

2

+

+

+

3

+

4

+

+

+

+

5

+

+

+

+

+

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