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题型:综合题 题类:常考题 难易度:普通

备考2021年新高考生物二轮复习专题15 基因工程和细胞工程

荧光蛋白(GFP)在紫外光下会发出绿色荧光,某科研团队将GFP基因插入质粒P中构建了重组质粒载体P0 , 用于基因工程中基因表达载体(P1)的筛选和鉴定。部分过程如下图所示,下表为部分限制酶的识别序列及切割位点。回答下列问题。

(1)、过程①中用EcoRⅤ酶切获得的目的基因具有末端,过程②表示利用PCR技术扩增目的基因,前提是要根据,设计出引物,此外还需在引物的一端加上序列,以便于P1的构建和筛选。
(2)、过程③中,质粒P0需用限制酶切割,才能与扩增出的目的基因在酶作用下形成P1
(3)、为了筛选出含有质粒P1的菌落,需采用添加的培养基平板进行培养,在紫外光激发下的菌落,即为含有P1的菌落。
(4)、提取经上述筛选所得菌落的RNA,通过获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出目的基因,可能的原因是
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