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题型:实验探究题 题类:模拟题 难易度:普通

河南省安阳市2018届高三下学期毕业班生物高考二模试卷

农作物秸秆中含有的纤维素阻碍了堆肥技术在处理有机固体废物领域的发展。为提高堆肥品质:科研人员探究了温度对纤维素分解菌分解能力的影响,实验步骤如下:①纤维素分解菌的筛选、分离及纯化→②纤维素分解菌菌株数量测定→③纤维素酶活力测定和降解滤纸能力的检测。请问答下列问题:
(1)、步骤①中,若用稀释涂布平板法接种,则必须将菌液进行一系列的,接种所需的培养基中通常加入制成固体培养基。已知纤维素酶的最适温度在45~65℃之间,欲从45~65℃的恒温箱中筛选出能高效分解纤维素的细菌,请写出测定纤维素酶的最适温度的实验思路:
(2)、步骤②中,在条件适宜的环境下培养细菌10d后,用(填一种实验用具)在显微镜下可计算细菌数量。此方法中的“条件”至少包括:适宜温度、以作为唯一碳源的(填“固态”“半固态”或“液态”)培养基等。可用台盼蓝染液鉴定视野中细菌是否死亡,原理是
(3)、步骤③中,酶活力可用培养基上菌落直径及来表示。
举一反三

井冈霉素是我国目前防治水稻纹枯病的主导农药,由于多年的单一使用,部分地区纹枯病菌对其产生了不同程度的抗药性,迫切需要研发有类似效果的新型替代生物农药.从细菌M18中提取的申嗪霉素能有效抑制水稻纹枯菌,与其它农药相比对人体和动物安全性高.为了开发更稳定、高产的新型菌株,科研人员进行了以下研究.请回答下列问题:

(1)筛选菌株选择{#blank#}1{#/blank#} (健康/患纹枯病)的水稻植株的根切成小段放入液体培养基中培养24h后,取适量培养液涂布于琼脂平板上,培养5天后,挑选形态不同的{#blank#}2{#/blank#}  , 对其进行编号.然后挑取少许菌株分别接种于长满水稻纹枯菌的琼脂平板上,培养3天后,观察纹枯菌的生长,根据{#blank#}3{#/blank#} 选出编号为P12的理想菌株.

(2)鉴定菌株P12所属的细菌类型提取P12基因组DNA,扩增其16S rDNA(能体现不同菌属之间的差异),扩增过程需要的酶有{#blank#}4{#/blank#} ,还需要特定的{#blank#}5{#/blank#}  . 对其测序后确定该菌株所属细菌类型.

(3)检测P12的细胞毒性

用人肺癌细胞系A549作为指示株系,在37℃恒温培养箱中培养.通入的空气应含{#blank#}6{#/blank#} ,培养液中含少量胎牛血清,目的是{#blank#}7{#/blank#} .2h后分别将相同浓度的P12、M18和DH5α(人体肠道内共生的大肠杆菌)菌液5μL加入A549细胞培养液中,4h后测定吸光值,以表示乳酸脱氢酶(LDH)的释放量.LDH是活细胞内含有的酶,当细胞受到细菌攻击时,细胞膜的{#blank#}8{#/blank#} 改变,LDH释放至细胞外.测定结果显示,P12对A549细胞的毒性{#blank#}9{#/blank#}

(4)部分地区的纹枯菌对井冈霉素产生抗药性的原因,是由于{#blank#}10{#/blank#} 对细菌进行长期的选择,使细菌的{#blank#}11{#/blank#} 发生了改变的结果.

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