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题型：综合题题类：难易度：普通

广东省八校2024-2025学年高三上学期8月联合检测生物试题

磷酸吡哆醛（PLP）是维生素B6的活性形式，是多种酶的重要辅酶。科研人员从大肠杆菌（E．colik12）中找到了合成PLP的关键酶A，通过基因工程构建了高产PLP的工程菌，流程如下图所示。质粒中Lacz基因可以使细菌能够利用物质X—gal，从而使菌落呈现蓝色，若无该基因，菌落则白色。回答下列问题：

（1）、图1中①②过程具体操作如图2，用限制酶从大肠杆菌DNA中获取酶A基因。利用PCR扩增酶A基因需要在含Mg²⁺的缓冲溶液中添加模板、4种脱氧核苷酸和，PCR每次循环的基本过程是。

（2）、过程③在培养基中加入（填“青霉素”“X—gal”或“青霉素和X—gal”）筛选出呈色的菌落即为所需工程菌。

（3）、用方法检测酶A基因在工程菌中是否表达出目的蛋白。

（4）、为探究④过程得到的是否为高产PLP工程菌，请简要写出实验思路：。

举一反三

下列实验或过程中没有运用放射性同位素标记法的是（　　）

我国科学家利用Bt毒蛋白基因转入普通棉花，培育出转基因的抗虫棉，对棉铃虫有较强抗性。回答下列问题：

有关PCR技术的说法错误的是（）

Ⅰ型糖尿病是因免疫系统将自身胰岛素作为抗原识别而引起的自身免疫病。小肠黏膜长期少量吸收胰岛素抗原，能诱导免疫系统识别该抗原后应答减弱，从而缓解症状。科研人员利用Ⅰ型糖尿病模型小鼠进行动物实验，使乳酸菌在小鼠肠道内持续产生人胰岛素抗原，为此构建重组表达载体，技术路线如下。

据图回答：

Southern印迹杂交是进行基因组 DNA 特定序列定位的通用方法。其基本方法是：利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的 DNA 片段，将凝胶上的 DNA变性并在原位将单链DNA 片段转移至硝酸纤维膜上并固定，再与放射性标记的探针进行杂交，利用放射自显影检测特定DNA分子。根据信息判断下列说法中错误的是（　　）

目前在PCR反应中使用Taq DNA聚合酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是{#blank#}1{#/blank#}。

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