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题型：综合题题类：难易度：困难

山东省临沂市临沭县临沭第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题

CRISPR-Cas12a系统是第二类用于编辑哺乳动物基因组的CRISPR-Cas系统，该系统主要包含crRNA和Cas12a蛋白两部分，crRNA能特异性识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas12a蛋白到相应位置剪切DNA。某科研团队基于CRISPR-Cas12a系统对宫颈癌细胞中的KIFC1基因进行敲除，来探讨KIFCI基因在宫颈癌细胞中的功能及对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。

（1）、在CRISPR-Cas12a系统中，crRNA的序列与目的基因特定碱基序列部分结合，结合区域最多含种核苷酸；细菌细胞中的也能起到类似Cas12a蛋白的作用。若要将KIFCI基因从目标DNA上剪切下来，需要设计种crRNA。

（2）、为保证目的基因与PX458质粒正确连接，在扩增目的基因时，应在引物端加入相应的限制酶序列，其中P1的碱基序列为5^'3^'（写出前9个碱基）。采用PCR技术对一个DNA进行扩增时，第n次循环共需要引物个。

（3）、在目的基因与PX458质粒连接时，可用（填“E.coliDNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）进行连接。

（4）、将crRNA-Cas12a重组载体成功转染至HeLa细胞，与对照组相比，实验组中KIFCl蛋白表达量如图2所示，细胞数目的变化如图3所示，由此可得出的结论是，判断依据是。

举一反三

聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55 ℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是

豌豆叶肉细胞和HIV中的核酸，含有的碱基种类依次是（）

人类复合型免疫缺陷症患者体内缺失腺苷酸脱氨酶(ADA)的基因，导致体内缺乏腺苷酸脱氨酶。随着基因工程的不断发展，科学家利用基因治疗治愈了人类复合型免疫缺陷症，过程如下图所示。

回答下列问题：

医学研究发现，人体肝细胞中产生的抗凝血酶Ⅲ在抗凝血、防血栓方面具有重要作用。研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产抗凝血酶Ⅲ。请回答下列问题：

有些人饮用牛奶后，不能完全消化牛奶中的乳糖。若将乳糖酶基因导入奶牛基因组中，可以使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大减少，而其他营养成分不受影响。请回答下列问题：

下图为某种cDNA基因的制作流程图，相关叙述错误的是（　　）

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