研究人员利用小鼠（2N=40）的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠，其主要技术流程如图所示：注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置；Amp′是氨苄青霉素抗性基因，Neo′是G418抗性基因．

题型：综合题题类：模拟题难易度：普通

2017年广东省广州市高考生物一模试卷

研究人员利用小鼠（2N=40）的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠，其主要技术流程如图所示：

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置；Amp′是氨苄青霉素抗性基因，Neo′是G418抗性基因．

（1）、重组质粒上的抗生素抗性基因可作为，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞，氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞，结合如图推测，过程①选用的2种限制酶是

（选填图中的编号），图中③处的培养液应添加（填“氨苄青霉素”或“G418”）．

（2）、若图中过程①选用的2种限制酶识别序列和切割位置分别是

和

，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是，此时，图中过程②应选用（填“E•coliDNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）．

（3）、据图分析，细胞乙内除线粒体DNA外，还有个DNA分子；细胞乙发育成桑椹胚的过程中细胞分裂方式是，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为技术．

举一反三

如下图所示，人体细胞内含有抑制癌症发生的P53(P⁺)基因有两个部位能被E酶识别；癌症患者的P53基因突变后为P^-。现有某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460个碱基对的四种片段，那么他的基因型是（）

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