（2017•江苏卷）金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理．PCR扩增过程示意图如图，请回答下列问题：

题型：综合题题类：真题难易度：普通

2017年高考生物真题试卷（江苏卷）（正式版）

金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理．PCR扩增过程示意图如图，请回答下列问题：

（1）、从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA，通过获得用于PCR扩增．

（2）、设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物（引物1和引物2），为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的位点．设计引物时需要避免引物之间形成，而造成引物自连．

（3）、图中步骤1代表，步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环．

（4）、PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键．退火温度过高会破坏的碱基配对．退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但的引物需要设定更高的退火温度．

（5）、如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有（填序号：①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物）．

举一反三

回答下列问题：

①同一种限制酶②具有某些标记基因的质粒③RNA聚合酶④目的基因⑤DNA连接酶⑥启动子⑦终止子

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