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题型:综合题 题类:常考题 难易度:普通

2015-2016学年河北省衡水市故城高中高二上学期期末生物试卷

GDNF是一种神经营养因子.对损伤的神经细胞具有营养和保护作用.研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究.请回答:

(1)、在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是
(2)、构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的限制酶进行酶切.
(3)、经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示).为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示.图中第泳道显示所鉴定的载体是正向连接的.
(4)、将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的与提取的蛋白质杂交.当培养的神经干细胞达到一定的密度时,需进行培养以得到更多数量的细胞,用于神经干细胞移植治疗实验.
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