乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：

(1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用{#blank#}1{#/blank#} 作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是{#blank#}2{#/blank#} 。从功能上讲，这种培养基属于{#blank#}3{#/blank#} 。

(2)培养微生物L前，宜采用{#blank#}4{#/blank#} 方法对接种环进行灭菌。

(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越{#blank#}5{#/blank#} .

(4)乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的{#blank#}6{#/blank#} 确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括{#blank#}7{#/blank#} 、{#blank#}8{#/blank#} 、离子吸附法及交联法等。

如图是某同学制作果酒和果醋的实验流程图以及预分离土壤中能分解尿素的细菌的培养基配方，请回答有关问题．

（1）图中方框内应该填写的实验步骤是{#blank#}1{#/blank#} ，此步骤中起主要作用的微生物是{#blank#}2{#/blank#} ，其发酵时{#blank#}3{#/blank#} （需要/不需要）氧气，适宜的发酵温度范围是{#blank#}4{#/blank#} ．

（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？{#blank#}5{#/blank#}（能/不能），原因是{#blank#}6{#/blank#} 

（3）如果想进一步对初步筛选得到的菌株进行纯化并计数，可采用的接种方法是{#blank#}7{#/blank#} ．通常鉴定分解尿素的细菌的方法是在培养基中加入{#blank#}8{#/blank#} 指示剂．