- 二一组卷

题型：综合题题类：模拟题难易度：普通

广东省惠州市2019年高三生物高考一模试卷

科研人员培育了一种能够降解餐厨废弃物并生成乳酸的转基因毕赤酵母。基本思路是在乳酸脱氢酶基因（LDH）的单基因表达载体中逐个接入糖化酶基因（Ga）表达盒与α-淀粉酶基因（Amy）表达盒，构建出AGL-三基因表达载体，如图1所示：（ori为复制原点；Zeocin R为博来霉素抗性基因；）LDH-单基因表达载体①②GL-二基因表达载体AGL-三基因表达载体oriZeocin RLDHAmyGaBglⅡBamHⅠA．糖化酶基因表达盒BglⅡBamHⅠB．α-淀粉酶基因表达盒BglⅡBamHⅠ③C④D．基因重组毕赤酵母E．表达检测。

（1）、获取目的基因：利用PCR技术获得目的基因的过程中，需要在PCR反应体系中加入模板、Taq酶及。

（2）、将图1所示结构“导入”毕赤酵母后，要筛选出含有三基因表达载体的毕赤酵母的操作思路是：。

（3）、对筛选出的菌株进行进一步鉴定的方法有：（写出一种）。利用转基因毕赤酵母降解餐厨废弃物生成乳酸，既减少了环境污染，也降低了乳酸的生产成本，这符合生态工程中的原理。

（4）、构建三基因表达载体的难点在于构建目的基因的表达盒，图2LDH-单基因表达载体①②GL-二基因表达载体AGL-三基因表达载体oriZeocin RLDHAmyGaBglⅡBamHⅠA．糖化酶基因表达盒BglⅡBamHⅠB．α-淀粉酶基因表达盒BglⅡBamHⅠ③C④D．基因重组毕赤酵母E．表达检测为构建α-淀粉酶基因表达盒的示意图（糖化酶基因表达盒构建与之类似，此处省略）。

注：pro为启动子；AOX TT为终止子；Bsp119Ⅰ、XbaⅠ、Bgl II、BamHⅠ为四种限制酶）LDH-单基因表达载体①②GL-二基因表达载体AGL-三基因表达载体oriZeocin RLDHAmyGaBglⅡBamHⅠA．糖化酶基因表达盒BglⅡBamHⅠB．α-淀粉酶基因表达盒BglⅡBamHⅠ③C④D．基因重组毕赤酵母E．表达检测

操作➀的处理是：将质粒1与α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ与XbaⅠ两种不同的限制酶处理，然后拼接。与用一种限制酶切相比，优点是；在此之前，科研人员还利用点突变技术对α-淀粉酶基因序列进行了同义密码子替换（即不影响氨基酸序列）改造，推测其原因。操作➁中必需用酶对质粒2处理，才能获得能正常表达的α-淀粉酶基因表达盒。

举一反三

下列关于基因工程的说法正确的是（）

质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)，请根据表中提供的细菌生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是

某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是（）

下列关于基因工程运载体必备条件的叙述，错误的是（）

培育转基因抗虫棉，采用的方法是（）

分析并完成选项：①基因治疗是基因工程在医学上的应用之一，即把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的．②格里菲思实验：加热杀死的S型肺炎链球菌+R型菌落 $\text{[math]}$ R型菌落+S型菌落．从变异的角度分析，①②变异的来源分别为（）

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