- 二一组卷

题型：综合题题类：常考题难易度：普通

广东省深圳市深圳高级中学2019届高三上学期生物12月月考试卷

嗜热菌可以生活在98℃的高温环境中，研究发现其耐热性与基因H的表达产物有关。下图表示某研究小组利用大肠杆菌对H基因实行的克隆和表达过程，其中NdeⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、SalⅠ四种限制酶的识别序列和酶切位点分别为CA^↓TATG、G^↓AATTC、A^↓AGCTT、G↓TCGAC。请分析回答：

（1）、图中的结构A是，其主要作用是。一个完整的基因表达载体组成，除了质粒1中所示结构以外，还应该含有。

（2）、用图中质粒1和H基因构建重组质粒，应选用两种限制酶进行切割，影响限制酶处理效果的因素可能有（多选）。

①反应温度 ②缓冲液pH ③限制酶的浓度 ④DNA样品的纯度

（3）、实验中发现，重组质粒导入大肠杆菌后H基因的表达效率很低，但在含有质粒2（辅助性质粒）的细胞中，H基因可以高效表达。为了筛选出转入了两种质粒的受体菌，应在筛选平板培养基中添加，整个实验过程应保持操作。

（4）、PCR反应中引物的设计非常关键，据图分析，扩增H基因时应选择的一对引物是_________。

A、引物Ⅰ：…GGGAATTC…；引物Ⅱ：…CTCATATG… B、引物Ⅰ：…GAATTCCC…；引物Ⅱ：…CATATGAG… C、引物Ⅰ：…GGAAGCTT…；引物Ⅱ：…AAGCTTCC… D、引物Ⅰ：…CTCATATG…；引物Ⅱ：…AAGCTTAAGCTT…

举一反三

PCR技术扩增DNA,需要的条件是 ( )
①目的基因 ②引物　③四种脱氧核苷酸　④耐高温的DNA聚合酶等
⑤mRNA ⑥核糖体

PCR技术的操作步骤依次是（）

下列有关PCR技术的实验过程叙述，不正确的是（　　）

下列属于PCR技术的条件的是（　　）

①单链的脱氧核苷酸序列引物

②目的基因所在的DNA片段

③脱氧核苷酸

④核糖核苷酸

⑤DNA连接酶

⑥DNA聚合酶

⑦DNA限制性内切酶

多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术．PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）．下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（　　）

草鱼病毒性出血病是由草鱼呼吸孤病毒（GCRV）引起的，目前尚未找到防治药物.如图是通过基因工程方法将PV7双基因与某质粒连接，并通过草鱼攻毒实验检测免疫保护效果的过程示意图.图中P10和pH为启动子，箭头表示转录方向.PV71和PV72为GCRV外壳蛋白基因（DNA片段）.请回答下列问题：

草鱼病毒性出血病核酸疫苗实验鱼的死亡率和免疫保护率记录表

组别	疫苗注射量	实验鱼数	死亡鱼数	死亡率	免疫保护率
1	10μg	20尾	0尾	0	100%
2	30μg	20尾	0尾	0	100%
3	60μg	20尾	1尾	5%	95%
空载体	30μg	20尾	6尾	30%	70%
对照	0	20尾	20尾	100%	0

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