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题型：综合题题类：模拟题难易度：普通

广东省深圳市2019届高三下学期第一次调研考试理科综合生物试卷

草鱼生长激素基因可促进鲤鱼生长，利用精子载体法（将构建好的表达载体与精子混合培养，使外源基因进入精子内），可将草鱼生长激素基因导入鲤鱼受精卵细胞，培育转基因鲤鱼。请回答。

（1）、基因工程中，一个完整的表达载体包含复制原点、启动子及、和标记基因。通常采用技术获得大量的基因。

（2）、作为载体的精子取自鱼，精子载体法与显微注射法相比，精子载体法对受精卵中核的影响会更小，理由是。

（3）、可通过检测鲤鱼体内激素增加量或来检测目的基因是否成功表达。

（4）、表达载体上的启动子通常选择来自鲤鱼肌动蛋白基因，原因是。

举一反三

回答下列与基因工程有关的问题：

如图所示为农杆菌转化法示意图。请回答以下问题：

回答下列（1）、（2）小题：

下图为某种cDNA基因的制作流程图，相关叙述错误的是（　　）

PET是一种聚酯类塑料，全球每分钟生产约100万个PET塑料瓶。科学家从能够利用PET作为碳源的细菌中分离出了一种能降解PET的解聚酶。PET在70℃时才能完全变为液态，便于降解，但PET解聚酶不耐高温。为此，科研人员借助定向进化策略，提高PET解聚酶耐受高温的能力。该策略经历多轮定向进化（每一轮均在上一轮筛选出的目标菌株上开展），其涉及的信息如表所示。

每一轮的基本流程	定向进化（轮次）
每一轮的基本流程	第一轮	第二轮	第三轮	第四轮	第五轮	第六轮
①基因突变和转化	将突变后的PET解聚酶基因导入大肠杆菌
②分离纯化和鉴定的菌株	5种	13种	4种	3种	5种	9种
③提取出的PET解聚酶预保温和酶活测定条件	1h/55℃	1h/60℃	1h/65℃	1h/70℃	1h/80℃	7h/70℃
④选出的PET解聚酶中变化的位点数	2个	1个	2个	3个	3个	5个

（1）研究人员从土壤样品中分离能产生PET解聚酶的细菌时，所使用的培养基成分应包括________（编号选填）。

①（NH₄）₂SO₄ ②淀粉 ③PET ④无机盐

（2）据所学知识判断，分离PET解聚酶的细菌所使用的培养基类型属于________．（编号选填）

①天然培养基 ②合成培养基 ③液体培养基

④通用培养基 ⑤固体培养基 ⑥选择培养基

（3）表中流程②宜选用的接种方法为________（平板划线/稀释涂布），其目的是________。

A.对大肠杆菌进行计数

B．扩大大肠杆菌种群数量

C．便于分离提取PET解聚酶

D．将导入不同突变基因的大肠杆菌分离开

（4）本研究采用的定向进化策略，相比自然界的进化过程，区别是_______。

A. 发生基因突变	B. 实现个体进化
C. 加快进化速度	D. 模拟自然选择

（5）据题干及所学知识分析，研究人员在第6轮中设置70℃且长时间保温（7小时）的目的是________。

（6）据题干信息判断，获取耐高温PET解聚酶的过程涉及_____。

A. 基因工程

B. 细胞工程

C. 发酵工程

D. 蛋白质工程

天然PET解聚酶基因（792bp）部分编码链序列以及用于表达载体构建的质粒结构如下图所示：

5’ATGCAGACTAACCCCTATGCTCGCGGG………GATTTTCGCACTGCTAACTGCAGC3'

（7）已知天然PET解聚酶基因不含合适的酶切位点，但可借助PCR解决该问题。据图信息判断，为了便于表达载体的构建，在设计PET解聚酶基因PCR反应体系时，应选择引物________。（编号选填）

①5’TACATATGCAGACTAACCCCTATGCTCG3’

②5’TGCTCGAGATGCAGACTAACCCCTATGC3’

③5’TACATATGGCTGCAGTTAGCAGTG3’

④5’TGCTCGAGGCTGCAGTTAGCAGTG3’

（8）为鉴定表达载体构建是否正确，研究人员从目标菌株中提取质粒，并经XhoI和NdeI充分处理后进行凝胶电泳。根据下图结果判断，含目的基因的菌落是________。

促红细胞生成素(EPO)是一种能刺激骨髓造血的糖蛋白类激素。生产重组人促红细胞生成素(rhEPO)时，需构建EPO基因(E基因)表达载体(如图所示)，并将E基因导入受体细胞CHO-DHFR^- ，通过细胞培养生产rhEPO。回答下列问题：

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