- 二一组卷

题型：综合题题类：难易度：困难

上海市财经大学附属北郊高级中学2024-2025学年高三上学期期中考试生物试题

丁二醇广泛应用于化妆品和食品等领域，兴趣小组在已改造的大肠杆菌中引入合成丁二醇的关键基因X，以提高丁二醇的产量。下图为部分过程，表为部分限制酶识别序列及切割位点。

限制性内切核酸酶	BamHⅠ	XhoⅠ	BclⅠ	SacⅠ
识别序列及切割位点	5'-C↓GATCG-3'	5'-C↓TCGAG-3'	5'-↓GATC-3'	5'-GAGCT↓C-3'

（1）、扩增X基因时，PCR反应中需要使用加入的材料有。（编号选填）

①解旋酶②耐热的DNA聚合酶③特异性引物④DNA模板链⑤脱氧核苷三磷酸底物⑥DNA编码链

（2）、为获得重组质粒，可在X基因两端添加。（编号选填）

①XhoⅠ和BclⅠ的识别序列②SacⅠ和BclⅠ的识别序列③XhoⅠ和BamHⅠ的识别序列④SacⅠ和BamHⅠ的识别序列

（3）、重组质粒转化入大肠杆菌，并涂布在无抗生素平板上．在此基础上，进一步筛选含目的基因菌株的实验思路是。

（4）、实验发现，大肠杆菌培养基中pH偏低，分析原因可能是______。

A、碳源不足 B、杂菌发酵 C、氮源过多 D、无机盐过少

（5）、兴趣小组通过单因子实验确定了木薯淀粉和酵母粉的最适浓度分别为100g·L^-1和15g·L^-1 ，在此基础上，设置不同浓度的木薯淀粉（90g·L^-1、100g·L^-1、110g·L^-1）和酵母粉（12g·L^-1、15g·L^-1 ， 18g·L^-1）筛选碳源和氮源浓度的最佳组合，以获得较高发酵产量，理论上应设置（填数字）组实验（重复组不计算在内）。

（6）、研究发现，将X基因编码组氨酸定点突变为酪氨酸可提高丁二醇的产量．已知X基因编码链第468-488位碱基序列为5'-GATACA…GGACATGGG…ACGAAT-3'。为实现上述突变，应设计的引物序列是。（编号选填）（组氨酸：CAU、CAC 酪氨酸：UAU、UAC）

①3'-CTATGT-5' ②5'-GGATATGGG-3' ③3'-GATACA-5'④3'-GGAATAGGG-5'⑤5'-ATTCGT-3'⑥5'-CCCATATCC-3'⑦5'-GATAGA-3' ⑧3'-CCTTATGGG-5'

（7）、除采用PCR技术获得单碱基突变基因外，还可以对上述单碱基编辑技术获得定点突变目的基因，你倾向于选择哪种技术获得定点突变基因？阐述理由。

举一反三

资料显示，近十年来，PCR技术（DNA聚合酶链式反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制（如图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体．请据图回答：

透明质酸酶是一种能够降低体内透明质酸的活性，从而提高组织中液体渗透能力的酶。如图是利用重叠延伸PCR技术获得新透明质酸酶基因的过程，NcoⅠ和XhoⅠ为限制酶。请分析回答下列问题：

基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段。如图是基因工程示意图，请据图回答下列问题：

中国科学家领衔的国际团队发现，驯鹿能适应极昼和极夜的环境而不会出现睡眠紊乱的原因是节律调控有关基因PER2发生突变，利用PCR 技术可获取和扩增PER2 基因，下列有关说法错误的是（）

构建生物传感器是一个复杂的过程，需要深入理解分子生物学和遗传学原理，同时还需要具备熟练的实验技能和丰富的实践经验。向细菌中导入一些特殊的DNA序列作为生物传感器，可制备出在特定环境中优先生长的工程菌，研究者利用如图所示的原理分别设计氧气传感器和乳酸传感器。

回答下列问题：

为提高小对磷元素的吸收能力，研究人员通过质粒P把水稻耐低磷因导入小麦细胞得到耐低磷转基因小麦，基本流程如下图。质粒P含3种限制酶（NheⅠ、EcoRⅠ、SalⅠ）切割位点，全部切割可以得到F₁、F₂、F₃、F₄片段，标记基因和启动子分别位F₁和F₂片段中。耐低磷基因两侧的限制酶切割位点为NheⅠ和SalⅠ，据图回答下列问题：

（1）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是{#blank#}1{#/blank#}法，还有基因枪法和我国科学家独创的{#blank#}2{#/blank#}法。

（2）有人将质粒P用NheⅠ与SalⅠ双酶切割后，与耐低磷基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，得到的重组质粒不一定都是所需要的，原因是{#blank#}3{#/blank#}。

因此，需采取以下步骤进行重组质粒的构建：

第一步，取质粒P用{#blank#}4{#/blank#}和{#blank#}5{#/blank#}酶切割，从中选取{#blank#}6{#/blank#}片段备用；

第二步，另取质粒P用{#blank#}7{#/blank#}和{#blank#}8{#/blank#}酶切割，从中选取{#blank#}9{#/blank#}片段备用；

第三步，将耐低磷基因与前两步选取的片段用DNA连接酶连接即可得到所需重组质粒。

（3）剥取小麦种子的幼胚接种在诱导培养基上经{#blank#}10{#/blank#}形成愈伤组织，该过程需要的植物激素有{#blank#}11{#/blank#}，将重组质粒导入愈伤组织，培养一段时间后，还需要转移至{#blank#}12{#/blank#}培养基上。

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