题型：综合题 题类： 难易度：普通
重庆市名校联盟2024-2025学年高三上学期11月期中联合考试生物试题
山楂具有健脾消食、降脂降压等功效，但采摘、加工、运输中受损伤的山楂细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触，引起山楂褐变，导致品质降低。为减少由此带来的损失，科研人员进行了相关研究。
Ⅰ.在波长为420nm的光下测量PPO酶促反应得到的有色物质的吸光度值（颜色越深吸光度值越大）。其单位时间内的变化可代表PPO的活性。具体做法是：以适量且适当浓度的pH为6.8的磷酸盐缓冲液、反应底物溶液以及PPO液作为反应体系，测量并绘制曲线图（图1）。据图分析回答问题。
（1）据图1分析测定酶活性的反应时间应不超过3分钟为宜，原因是：。
（2）为减少褐变带来的损失，科研人员用pH为6.8的磷酸盐缓冲液配制成不同浓度的三种待测抑制剂溶液，研究其对PPO活性的影响，结果如图2所示。该实验缺少，其中应加入、反应底物溶液以及PPO液，适宜的条件下测出最大酶活性。各实验组测得的酶活性与对照组相比，作为PPO相对酶活性。
Ⅱ.为探究温度对PPO活性的影响，实验小组进行如下实验：
（3）PPO粗提液的提取在低温条件下将新鲜山楂用蒸馏水洗净、去皮，取20g样品放入含50mL磷酸盐缓冲液（pH值为5.5）的研钵中，同时加入少量石英砂，研磨、离心、上清液即为PPO的粗提液，加入少量石英砂目的是。
（4）不同温度下PPO活性的测定
步骤顺序 | 试管1 | 试管2 | 试管3 | 试管4 | 试管5 | 试管6 | 试管7 | 试管8 |
PPO 粗提液 | 2mL |
| 2mL |
| 2mL |
| 2mL |
|
酚类底物 |
| 2mL |
| 2mL |
| 2mL |
| 2mL |
反应 | 混合振荡 | 混合振荡。 | 混合振荡 | 混合振荡 | ||||
温度预处理 | (5min) 0℃ | 15℃ | 30℃ | 45℃ | ||||
保温时间 | 5min | 5min | 5min | 5min | ||||
（注：反应底物充足；实验结果中“+”越多褐色越深）
①实验步骤顺序有不妥之处，请改正。
②实验结果表明：15℃和30℃温度条件，PPO具有相同的活性，从酶的特性分析其原因是。
③该实验中，各实验组的pH值均为5.5的原因（答两点）
试题篮
