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高考生物二轮复习专题学案:14 基因工程
促红细胞生成素(EPO)是一种能刺激骨髓造血的糖蛋白类激素。生产重组人促红细胞生成素(rhEPO)时,需构建EPO基因(E基因)表达载体(如图所示),并将E基因导入受体细胞CHO-DHFR
-
, 通过细胞培养生产rhEPO。回答下列问题:
(1)、
从人肝细胞中提取mRNA,以mRNA为模板采用RT-PCR方法扩增获得EPO的cDNA(E基因)时所需的酶是
。PCR所需的引物如下:
引物P1、P2的作用是
,通常限制酶的酶切序列设计在引物的
端。
(2)、
用PBT质粒和E基因构建PBT-E表达载体时所需的酶是
。某同学比较PBT和PBT-E的大小后,推测E基因的碱基长度为100 bp(bp表示碱基对),该推测是否正确?请说明理由:
。
(3)、
CHO-DHFR
-
为二氢叶酸还原酶缺失型细胞系细胞,只有在添加了次黄嘌呤和胸腺嘧啶的培养基上才能生长。将含有PBT-E与CHO-DHFR
-
细胞的培养液混合,完成转染,然后将细胞置于多孔培养板上,每个孔中最多有一个细胞,用选择培养基筛选。与正常动物细胞培养基相比,该培养基缺少的成分是
。经选择培养,在多孔培养板上,有的孔中出现了由细胞分裂产生的细胞集落。为从这些细胞集落中筛选出能产生rhEPO的细胞,应怎样筛选?
。
(4)、
工厂化生产rhEPO时,除营养条件外,还需满足的其他条件有
。
举一反三
下列各项不属于细胞工程在实际中应用的是( )
下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是( )
动物细胞培养是动物细胞工程的基础,如图所示,a、b、c表示现代工程技术,①、②、③表示其结果,下列说法正确的是 ( )
在动物细胞工程和胚胎工程中所用的物质和其发挥的作用正确的组合是( )
科学家将四种遗传基因导入皮肤细胞,发现皮肤细胞可转化为具有胚胎干细胞特性的细胞即诱导多能干细胞(iPS).回答下列问题:
研究人员用图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒(图中标注了相关限制酶切割位点),将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是( )
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