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题型:综合题 题类: 难易度:困难

2025届广东省两校高三第一次联合模拟考试生物试题

PET是一种聚酯类塑料,全球每分钟生产约100万个PET塑料瓶。科学家从能够利用PET作为碳源的细菌中分离出了一种能降解PET的解聚酶。PET在70℃时才能完全变为液态,便于降解,但PET解聚酶不耐高温。为此,科研人员借助定向进化策略,提高PET解聚酶耐受高温的能力。该策略经历多轮定向进化(每一轮均在上一轮筛选出的目标菌株上开展),其涉及的信息如表所示。

每一轮的基本流程

定向进化(轮次)

第一轮

第二轮

第三轮

第四轮

第五轮

第六轮

①基因突变和转化

将突变后的PET解聚酶基因导入大肠杆菌

②分离纯化和鉴定的菌株

5种

13种

4种

3种

5种

9种

③提取出的PET解聚酶预保温和酶活测定条件

1h/55℃

1h/60℃

1h/65℃

1h/70℃

1h/80℃

7h/70℃

④选出的PET解聚酶中变化的位点数

2个

1个

2个

3个

3个

5个

(1)研究人员从土壤样品中分离能产生PET解聚酶的细菌时,所使用的培养基成分应包括________(编号选填)。

①(NH42SO4   ②淀粉   ③PET   ④无机盐

(2)据所学知识判断,分离PET解聚酶的细菌所使用的培养基类型属于________.(编号选填)

①天然培养基   ②合成培养基   ③液体培养基

④通用培养基   ⑤固体培养基   ⑥选择培养基

(3)表中流程②宜选用的接种方法为________(平板划线/稀释涂布),其目的是________。

A.对大肠杆菌进行计数                    

B.扩大大肠杆菌种群数量

C.便于分离提取PET解聚酶             

D.将导入不同突变基因的大肠杆菌分离开

(4)本研究采用的定向进化策略,相比自然界的进化过程,区别是_______。
A. 发生基因突变B. 实现个体进化
C. 加快进化速度D. 模拟自然选择
(5)据题干及所学知识分析,研究人员在第6轮中设置70℃且长时间保温(7小时)的目的是________。
(6)据题干信息判断,获取耐高温PET解聚酶的过程涉及_____。
A. 基因工程B. 细胞工程C. 发酵工程D. 蛋白质工程

天然PET解聚酶基因(792bp)部分编码链序列以及用于表达载体构建的质粒结构如下图所示:

5’ATGCAGACTAACCCCTATGCTCGCGGG………GATTTTCGCACTGCTAACTGCAGC3'

(7)已知天然PET解聚酶基因不含合适的酶切位点,但可借助PCR解决该问题。据图信息判断,为了便于表达载体的构建,在设计PET解聚酶基因PCR反应体系时,应选择引物________。(编号选填)

①5’TACATATGCAGACTAACCCCTATGCTCG3’

②5’TGCTCGAGATGCAGACTAACCCCTATGC3’

③5’TACATATGGCTGCAGTTAGCAGTG3’

④5’TGCTCGAGGCTGCAGTTAGCAGTG3’

(8)为鉴定表达载体构建是否正确,研究人员从目标菌株中提取质粒,并经XhoI和NdeI充分处理后进行凝胶电泳。根据下图结果判断,含目的基因的菌落是________。

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