甜味蛋白 Brazzein 是从一种西非热带植物的果实中分离得到的一种相对分子质量较小的蛋白质,它含有54
个氨基酸,是目前最好的糖类替代品。迄今为止,已发现 Brazzein基因在数种细菌、真菌和高等植物、动物细胞中都能表达。回答下列问题:
(1)、从基因文库中提取Brazzein
基因时,根据 Brazzein 基因的核苷酸序列、、,以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取 。
(2)、基因工程的核心步骤是。将Brazzein
基因导入细菌、真菌和高等植物细胞时都可使用的常用载体是。
(3)、若受体细胞是大肠杆菌,首先用处理细胞,使其成为感受态细胞。Brazzein基因在大肠杆菌细胞内表达时, 表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加的抑制剂。