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题型:综合题 题类:模拟题 难易度:普通

湖南省2021年普通高等学校招生全国统一考试模拟演练生物试卷

p53基因是一种抑癌基因,在恶性肿瘤患者中突变率达50%以上。与人相比,大象体内含有多对p53基因,推测是其很少患肿瘤的主要原因。设计实验探究人p53基因在乳腺肿瘤细胞中的作用。回答下列问题:

(1)、利用PCR技术扩增p53基因。首先根据p53基因的核苷酸序列,设计并合成,其能与变性p53基因单链结合,在催化作用下延伸,如此循环多次。
(2)、p53基因表达载体的构建。如图所示,表达载体上除了标注的DNA片段外,在p53基因上游还必须拥有的DNA片段(箭头所示)是,其作用机理是。外源p53基因插入载体中至少需要两种工具酶,包括准确切割DNA的限制性核酸内切酶和将双链DNA片段“缝合”起来的
(3)、乳腺肿瘤细胞培养,完成伦理学审查和病人知情同意书签署后,将患者乳腺肿瘤组织块剪碎,制成细胞悬液在适宜的条件下培养。培养环境中所需的主要气体包括细胞代谢必需的和维持培养液pH值的。保持培养环境处于无菌无毒条件的操作包括(答出两点即可)。
(4)、检测p53基因表达对乳腺肿瘤细胞增殖的影响。分别将空载体和p53表达载体转入肿瘤细胞培养,采用特殊方法检测细胞增殖情况,并从培养的肿瘤细胞中提取蛋白质,用相应的进行杂交,检测p53基因翻译成蛋白质的情况,探索杂交带强度与细胞增殖率相关性。
举一反三
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