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题型：综合题题类：常考题难易度：普通

PCR技术的基本操作和应用

利用基因工程技术，可以使目的基因上特定的碱基发生替换，从而产生定向变异以获得性能更优异的蛋白质，其基本过程如图所示，请回答：

（1）、参照PCR技术，可用方法使质粒DNA双链解开，甲过程中加入的一定长度的核苷酸链，其中一个位置碱基C替代了碱基A，其它的序列与目的基因的一条链互补，该多核苷酸链在质粒DNA复制中作为．

（2）、乙过程是表示在DNA聚合酶作用下DNA链延伸，要形成闭合环状DNA分子，还需要酶的参与

（3）、丙和丁过程表示质粒分别导入目的细胞，进行增殖并，多代繁殖后，能指导突变蛋白质产生的质粒占总数的．

举一反三

人类复合型免疫缺陷症患者体内缺失腺苷酸脱氨酶(ADA)的基因，导致体内缺乏腺苷酸脱氨酶。随着基因工程的不断发展，科学家利用基因治疗治愈了人类复合型免疫缺陷症，过程如下图所示。

回答下列问题：

细胞色素P450酶在菇类天然产物合成过程中起重要（羟基化）作用，自然条件下，P450酶与其伴侣蛋白CPR（为P450酶传递电子）在细胞内分别表达，催化效率较低。研究人员推测，若将P450酶与CPR通过一段linker（3-9个氨基酸组成的柔性肽链）融合表达成一个蛋白（如图），催化效率会有不同程度提高。请回答：

在核酸分子杂交技术中，常常使用已知序列的单链核酸片段作为探针。为了获得B链作探针，可应用PCR技术进行扩增，应选择的引物种类是（）

安莎霉素是一类主要由海洋来源的稀有放线菌产生的活性大环内酰胺类次级代谢产物，具有较高的抗菌活性和药用价值。科研人员通常从深海采集淤泥样本，再分离、纯化并筛选出产安莎霉素的放线菌。一株海洋来源的稀有放线菌的分离培养流程如下图所示。请分析回答下列问题：

细胞色素P450氧化还原酶缺陷症（PORD）是一种单基因遗传病，该病在人群中的发病率为1/10000，图1是某PORD患者家系的遗传系谱图，图2中a、b、c、d条带分别是I₁、I₂、Ⅱ₅、Ⅱ₆的该对基因电泳检测结果（不考虑突变及X、Y染色体的同源区段）。下列叙述正确的是（）

利用PCR扩增目的基因时，不需要知道目的基因的全部碱基序列。(　)

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