题型:实验探究题 题类:常考题 难易度:普通
DNA的粗提取和鉴定
【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定
【实验目的】1.从酵母中提取RNA;2.鉴定RNA.
【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料,其中以酵母尤为理想,因为酵母核酸中主要是RNA,DNA很少,菌体易收集,RNA易分离.RNA不溶于乙醇和无水乙醚.RNA热稳定性较蛋白质强.利用稀碱法(稀碱能使细胞壁溶解)或高盐法(高浓度的盐改变细胞膜的通透性)来释放RNA.RNA水解液(加硫酸、加热)+苔黑酚﹣FeCl3试剂加热直到沸腾1分钟,会呈现墨绿色.
【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等;0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚﹣FeCl3试剂等.
【实验步骤】
①称6克干酵母②加0.2%氢氧化钠45mL,沸水加热20分钟,搅拌,后加乙酸7滴③离心10分钟后取上清液④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟⑤离心后先用95%乙醇洗两次,再用无水乙醚洗两次⑥获得RNA粗制品⑦RNA鉴定
请根据实验方案,思考并回答下列问题:
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份.每份10g.剪碎后分成两组,一组置于20℃、
另一组置于﹣20℃条件下保存24h.
DNA粗提取:
第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入l5mL研磨液,充分研磨.用两层纱布过滤.
取滤液备用.
第二步:先向6只小烧杯中分别注人10mL滤液,再加入20mL体积分数为95%的冷酒精
溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上.
第三步:取6支试管,分别加入等量的2mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物.
DNA检测:在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂.混合均匀后,置于沸水中加热5min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表.
材料保存温度 |
花菜 |
辣椒 |
蒜黄 |
20℃ |
++ |
+ |
+++ |
﹣20℃ |
+++ |
++ |
++++ |
分析上述实验过程,回答下列问题:
试题篮