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题型:综合题 题类:常考题 难易度:普通

2016-2017学年北京市昌平区高三上学期期末生物试卷

对棉纤维基因GhRACK1的正常启动子P进行改造,获得了P1,P2,P3,P4缺失体.科研人员对正常启动子P及其4种缺失体(P1﹣P4)进行了实验研究.

(1)、

首先利用PCR技术扩增正常启动子P,方法如图1.


①不能直接根据片段Ⅰ扩增出正常启动子P,因为

②利用酶处理使片段Ⅰ成为环状DNA.

③将环状DNA用酶处理,得到片段Ⅱ.欲扩增出正常启动子P,需选用的引物组合为

(2)、

利用有关酶对正常启动子P进行切割,得到不同程度缺失体(P1﹣P4),图2表示正常启动子P缺失示意图.

利用正常启动子P及其4种缺失体(P1﹣P4)分别构建了基因表达盒,如图3所示.

再将5种基因表达盒分别转入相同质粒,构建相应的植物表达载体.然后将其导入农杆菌,最后导入烟草细胞中.用含有的培养基对烟草细胞进行筛选,分别获得了含有正常启动子P及其4种缺失体(P1﹣P4)的转基因烟草.将植物组织浸入适量溶液中,观察烟草细胞gus基因是否表达,实验结果如下表.


花粉

正常启动子P

幼根+根毛+

P1

+

+

+

P2

+

+

+

P3

+

+

+

P4

+

+

+

有蓝色:+无蓝色:﹣

如果烟草细胞中gus基因成功表达,则细胞呈现蓝色.实验结果表明

与P1﹣P4的实验结果相比,说明正常启动子P发挥不同功能的关键序列位于图2的 . (填字母)

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