许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因（内含EcoRI的酶切位点），其编码的产物β﹣半乳糖苷酶在X﹣gal 和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使...

题型：综合题题类：常考题难易度：普通

2015-2016学年天津市八校联考高三上学期期末生物试卷

许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因（内含EcoRI的酶切位点），其编码的产物β﹣半乳糖苷酶在X﹣gal 和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色．基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如图所示．请据图回答：

（1）、限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是﹣G↓AATTC﹣，SmaⅠ的识别序列和酶切位点是﹣CCC↓GGG﹣．图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是．

（2）、获得目的基因后，常利用技术在体外将其大量扩增．

（3）、在构建基因表达载体的过程中，除了目的基因外，还必须有和复制原点和标记基因等．

（4）、转化过程中，大肠杆菌应先用处理，使其成为细胞．

（5）、菌落①②③中颜色为白色的是，原因是．

（6）、菌落③中的目的基因是否表达，可采用的分子检测办法是．

举一反三

①一个表达载体的组成必须有目的基因、启动子、终止子等3个部分

②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA

③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止

④所有基因表达载体的构建是完全相同的

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