题型:填空题 题类:常考题 难易度:普通
利用理化方法处理两种不同的细菌A、B,获得了能产生蛋白酶但不能产生谷氨酰胺酶的菌种A和不能产生蛋白酶但能产生谷氨酰胺酶的菌种B.现欲通过细胞工程技术进一步获得双高产优良新菌种,并检测有关酶对温度变化的敏感性.请分析回答:
(1)培育具有蛋白酶和谷氨酰胺酶双高产优良新菌种,过程如图1.
①利用亚硝酸、X射线等理化方法处理细菌,获得菌种A、B的原理是 .如果要获得具有蛋白酶和谷氨酰胺酶双高产优良新菌种,则可运用细胞工程中的 技术将其集中于一个单株,这不仅能突破物种之间的 ,还能定向、有效地按照人们的设计培育出理想的菌株.
②图2中a过程能获得细菌的原生质体;b过程表示混合并用促融剂处理,试管中出现了多种不同类型的细胞.如果细菌A、B分别只对抗生素甲或乙具有抗药性,则筛选用的基本培养基中需要添加的物质是 .
③图12中c如果是检测蛋白酶的产生效果,则应将待测菌稀释涂布在用 作为惟一氮源的固体培养基上,倒置培养,观察菌落周围出现的透明水解圈的状况.挑取 的菌落进行扩大培养,并进行酶活力实验.
(2)测定温度对蛋白酶活力稳定性的影响.下表是某人设计的相关步骤.
试管号 |
蛋白酶 溶液/mL |
pH5.6 缓冲液/mL |
处理酶缓冲 液15min |
1% 蛋清/mL |
反应温度(5min) |
冷却后加 班氏试剂/mL |
结果 (颜色变化) |
1 |
1 |
3 |
0℃ |
1 |
0℃ |
1 |
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2 |
1 |
3 |
40℃ |
1 |
40℃ |
1 |
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3 |
1 |
3 |
100℃ |
1 |
100℃ |
1 |
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①请改正表格中的某些实验步骤,以说明温度对蛋白酶活力稳定性的影响: .
②如果改正步骤后3号管的实验结果是 ,则说明蛋白酶对100℃高温不敏感.
(3)有关蛋白酶的应用.科研人员用戊二醛作交联剂来固定蛋白酶,研究固定化后的酶活力变化.结果如图2.
①与将酶溶液直接加入反应液相比,酶的固定化技术具有 等优越性.
②从对温度变化的适应性和温度适应范围的角度分析,图13所示结果可以得出的结论:
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