一对表现型正常的夫妇,生了一个β地中海贫血症患儿.在他们欲生育第二胎时,发现妻子的双侧输卵管完全堵塞,不能完成体内受精.医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断,最终喜获一健康女婴.请回答:(1)哺乳动物的体外受精主要包括{#blank#}1{#/blank#} 、{#blank#}2{#/blank#} 、{#blank#}3{#/blank#} 等主要步骤.
(2)在对胎儿进行β地中海贫血症的产前基因诊断时,要先从羊水中的胎儿细胞提取DNA进行PCR扩增,然后用限制酶对扩增产物进行切割,产生多个片段的酶切产物,再根据不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同,形成不同的电泳条带进行判断.
①PCR扩增与体内DNA复制过程中,解旋的方法不同,前者通过{#blank#}4{#/blank#}解开双链,后者通过{#blank#}5{#/blank#}解开双链.
②一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,大多数限制酶的识别序列由{#blank#}6{#/blank#} 个核苷酸组成.DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式,即黏性末端和平末端.当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是{#blank#}7{#/blank#} .
③利用PCR扩增目的基因也是目的基因获取的方法之一,除此以外,目的基因还可以从基因文库中获取,基因文库包含{#blank#}8{#/blank#}和{#blank#}9{#/blank#} 等类型,后者的基因中含有启动子.
④基因诊断的主要原理是{#blank#}10{#/blank#} .