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题型：综合题题类：常考题难易度：普通

江苏省启东中学2017-2018学年高二上学期生物期末考试试卷（选修）

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstI、SmaI、HindIII、AIuI等四种限制性核酸内切酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（amp^t为抗氨苄青霉素基因），其中①∽④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，I、II表示相关结构或细胞。请据图作答：

（1）、在构建重组DNA时，可用一种或多种限制性核酸内切酶进行切割，为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实验中应该选用限制性核酸内切酶分别对鱼抗冻蛋白基因和质粒进行切割，切割后产生的DNA片段分别为、种。

（2）、基因工程中核心步骤是（填序号），该步骤的目的是。为了使目的基因正常表达，其首端必须有启动子，它是识别和结合的部位。若限制酶切出了平末端，要选择进行连接。（填“E·coliDNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）

（3）、图中将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞的方法称为。它是利用运载体Ti质粒中含有，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上。

（4）、检测番茄植株细胞中鱼抗冻蛋白基因是否成功表达，从分子水平常采用的方法是。

举一反三

为了防止转基因作物的目的基因，通过花粉转移到自然界中其他植物体内，科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中，其原因是

如下图所示，人体细胞内含有抑制癌症发生的P53(P⁺)基因有两个部位能被E酶识别；癌症患者的P53基因突变后为P^-。现有某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460个碱基对的四种片段，那么他的基因型是（）

真核生物基因中通常含有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。下图表示从基因文库提取胰岛素基因的过程。回答下列问题：

下图表示我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程。请据图回答下列问题：

【生物—选修3 现代生物科技专题】

我国一科研团队将小麦液泡膜Na^＋/K^＋逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：

基因定点整合可替换特定基因，该技术可用于单基因遗传病的治疗。苯丙酮尿症是由PKU基因突变引起的，将正常PKU基因定点整合到PKU基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上，替换突变基因，可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是：从染色体DNA上突变PKU基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2，根据其碱基序列分别合成HB1和HB2，再将两者分别与基因 $\text{[math]}$ 、 $\text{[math]}$ 连接，中间插入正常PKU基因和标记基因 $\text{[math]}$ $\text{[math]}$ ，构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换，导致两者之间区域发生互换，如图所示。

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