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题型:综合题 题类: 难易度:普通

2024年广东省华南师范大学附属中学高三综合测试(三)生物试题

肝纤维化与肝细胞癌的发生密切相关。研究发现活化的人肝星状细胞会大量合成和分泌Ⅰ型胶原蛋白沉积在肝小叶的窦间隙,大量产生Ⅰ型胶原蛋白是肝星状细胞活化的标志之一。人Ⅰ型胶原蛋白由4条肽链组成,其中两条由COL1A1基因编码。为了建立能直观反映I型胶原蛋白表达量改变的细胞模型,本研究旨在通过基因工程技术构建人COL1A1和绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因表达载体,并将其导入到LX-2细胞(永生化的人肝星状细胞)中,为抗纤维化药物研发建立可视化的报告系统。

(1)、研究过程中,应将LX-2细胞置于含的气体条件下培养。
(2)、在构建基因表达载体过程中,所需要的工具酶有(请写出2点);其中Kozak序列能增强EGFP基因的表达,已知EGFP基因的α链为转录的模板链,则应将图2中EGFP基因的(“A”或“B”)端与Kozak序列连接。
(3)、已知LX-2细胞可被细胞因子TGF-β1活化,激活COL1A1基因表达,成为肝纤维化研究常见的细胞模型。科学家为验证LX-2细胞能通过EGFP表达来反映表达COL1A1能力的改变,进而筛选抗纤维化药物。对实验进行了分组处理,对照组为无诱导处理的LX-2细胞,模型组为,实验组为(实验材料:LX-2细胞、TGF-β1、已知具有潜在抗肝纤维化作用的药物青蒿琥酯)。实验结束后,检测各组LX-2细胞荧光强度和相关基因(COL1A1和EGFP)的表达水平,二者相互印证。若实验组的荧光强度均低于模型组的荧光强度,实验结果说明
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