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题型:综合题 题类: 难易度:困难

广东省2025届高三上学期第一次调研考试生物试题

聚羟基脂肪酸酯(PHA)是一种可降解的生物大分子,常用来制备环保塑料包装袋,研究人员通过构建受温度控制的大肠杆菌表达体系来生产PHA。为实现通过温度控制工程菌合成所需的蛋白质,科研人员利用下图方案,构建了相关的基因表达载体,然后将其导入大肠杆菌,获得相应的工程菌。

   

(1)、图1所示的基因表达载体中,RFP基因和GFP基因属于;启动子M和启动子R的类型虽然不同,但是二者都能与结合,启动基因的转录。
(2)、大肠杆菌在30℃和37℃均可生长和繁殖,据图1分析,当培养温度为30℃时,C基因编码的C蛋白形成二聚体,因而大肠杆菌表达荧光蛋白。
(3)、PHA的合成过程中,可由单体分子3HB和4HB随机聚合形成随机共聚物;也可以先合成3HB聚合体,再合成4HB聚合体,最后形成分段共聚物(如图2所示),其中分段共聚物形式的pHA品质更佳。请完善以下表格,通过改造上述方案以实现应用工程菌大规模生产优质PHA(不考虑各种酶在不同温度下的活性差异)。

操作

目的

对上述方案表达载体的改造为:①,并加入持续表达启动子连接的②基因。将构建好的表达载体导入大肠杆菌,获得工程菌。

获得可以合成PHA的工程菌。

以③为原料配置培养基,灭菌后加入上述工程菌。

配制培养基、接种。

控制发酵条件:30℃发酵12小时,随后切换至37℃发酵36小时。

发酵48小时,获得3HB

比例为④的分段共聚物。

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