已知生物体内有一种蛋白质(P),该蛋白质是一种转运蛋白,由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸,240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸,改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性。
(1)、利用PCR技术扩增目的基因时知道基因的全部序列。在PCR体系中除了模板、原料外,还应加入。
(2)、蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋白质功能出发,通过和,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。
(3)、“CRISPR/Cas9”技术是目前常用改造DNA序列的一种方法,下图为向导RNA引导Cas9蛋白切割目标DNA示意图。其中Cas9蛋白是一种
酶。Cas9蛋白和特定的向导引导序列可利用
法导入到动物受精卵或干细胞中发挥基因编辑作用。
(4)、经改造后的细胞,若想工业化大量制备蛋白质P1 , 可利用和技术将改造细胞转化为即可产生P1又能无限增殖的细胞,最后自培养液中可得到目的蛋白质。