- 二一组卷

题型：综合题题类：常考题难易度：容易

天津市宝坻区2018-2019学年高二下学期生物期末考试试卷

金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白。某研究小组计划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图图像，请回答下列问题：

（1）、从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA，通过获得cDNA用于PCR扩增。

（2）、设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物（引物1和引物2），为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的限制性核酸内切酶位点。设计引物时需要避免引物之间形成，而造成引物自连。

（3）、图中步骤1代表，步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环。

（4）、PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但的引物需要设定更高的退火温度。

（5）、如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有（填序号：①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物）。

举一反三

PCR技术通过对目的基因进行扩增，可以得到大量的目的基因，下面对该技术的叙述，正确的有(　　)
①遵循的基本原理是DNA半保留复制和碱基互补配对
②扩增仪内必须加入引物、原料和Taq酶
③每扩增一次，温度都要发生90℃75℃55℃的变化
④成指数式扩增，约为2ⁿ（n为扩增次数)

①PCR是一种酶促反应　 ②引物决定了扩增的特异性

③扩增DNA利用了热变性的原理　 ④扩增的对象是氨基酸序列．

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