病毒介导基因转移是现在基因治疗研究的最新方向，美、法等国成功采用腺病毒载体进行心、脑、肺、肝内胆管和肌肉组织的体内基因转移．其具体思路如图所示：回答下列问题：

题型：综合题题类：模拟题难易度：普通

2016年普通高等学校高考模拟押题试卷（一）（衡水金卷）

病毒介导基因转移是现在基因治疗研究的最新方向，美、法等国成功采用腺病毒载体进行心、脑、肺、肝内胆管和肌肉组织的体内基因转移．其具体思路如图所示：

回答下列问题：

（1）、如果要在短时间内获得较多的目的基因，通常采用技术，在操作步骤中包括两次升温和一次降温，其中降温的目的是．

（2）、构建基因表达载体时需要用到的工具酶有．

（3）、作为接受转移基因的体细胞应具有的特点是（写出一点即可）．在进行细胞培养时，当细胞贴满瓶壁时需用酶处理，使之分散成单个细胞，培养液中还需通人无菌气体，其中通入CO₂的目的主要是．

（4）、如果检测发现目的基因被成功导入了受体细胞，但却没有检测到目的基因相对应的蛋白质，应考虑位于目的基因首端的和末端的是否设计好，并从这方面进一步改善．

举一反三

据图回答：

①催化具有相同黏性末端的DNA片段之间连接

②催化具有不同黏性末端的DNA片段之间连接

③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成

④催化脱氧核糖与磷酸之间的磷酸二酯键的形成

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