资料1：巴斯德毕赤酵母菌可用培养基中甲醇作为其生活的唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达（5′AOX1和3′AOXl（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子）。

资料2：巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中已实现表达。

资料3：限制酶酶切位点

（1）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是{#blank#}1{#/blank#}法，还有基因枪法和我国科学家独创的{#blank#}2{#/blank#}法。

（2）有人将质粒P用NheⅠ与SalⅠ双酶切割后，与耐低磷基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，得到的重组质粒不一定都是所需要的，原因是{#blank#}3{#/blank#}。

因此，需采取以下步骤进行重组质粒的构建：

第一步，取质粒P用{#blank#}4{#/blank#}和{#blank#}5{#/blank#}酶切割，从中选取{#blank#}6{#/blank#}片段备用；

第二步，另取质粒P用{#blank#}7{#/blank#}和{#blank#}8{#/blank#}酶切割，从中选取{#blank#}9{#/blank#}片段备用；

第三步，将耐低磷基因与前两步选取的片段用DNA连接酶连接即可得到所需重组质粒。

（3）剥取小麦种子的幼胚接种在诱导培养基上经{#blank#}10{#/blank#}形成愈伤组织，该过程需要的植物激素有{#blank#}11{#/blank#}，将重组质粒导入愈伤组织，培养一段时间后，还需要转移至{#blank#}12{#/blank#}培养基上。